电子断层成像
电子断层成像通过在一系列倾转角下拍摄二维投影、再重构出三维体,在近原生状态下观察细胞内部。本库沿成像链路展开:从玻璃化制样、倾转序列采集,到缺失楔形这一核心限制,再到对齐与三维重构。
用 40 个投影、倾转范围 ±90° 重建。投影越多 → 越清晰、星状条纹越少;倾转被限制在 ±90°(< 90°)时,未采样的角度让重建在某个方向被拉长、模糊 —— 这就是缺失楔形在实空间的样子。
本库文章 9 篇
什么是冷冻电镜
把分子冻进玻璃态冰、用电子束成像 —— Cryo-EM 是什么,以及它的两条主线。
成像与数据采集
从制样、急冻,到镜筒里的电子光路与探测器,再到一张张(或一套套倾转序列)数据怎么拍出来。
根本限制
剂量与分辨率的取舍、样品厚度、以及断层成像独有的缺失楔形 —— Cryo-EM 绕不开的几道坎。
冷冻电镜与玻璃化
快速冷冻把生物样品固定为玻璃态冰,在近原生状态下保存结构以供电子成像。
倾转序列采集
断层图由样品在一系列倾转角下拍摄的多张二维投影构建而成。
缺失楔形
为什么 Cryo-ET 的断层重构总在竖直方向被拉长?
倾转序列对齐与基准点
重构之前,须把各投影配准到统一几何,以校正样品台移位与样品漂移。
从倾转序列到断层图
一堆二维投影是怎么"叠"成三维体的?反投影、为什么需要很多角度、以及缺失楔形从哪来
原位结构生物学
Cryo-ET 直接在细胞内、于其原生细胞环境中解析大分子结构。